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Tipo de Mídia:
Texto
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Formato:
.pdf
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Tamanho:
3.19
MB
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Título: |
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Diagnóstico molecular e sorológico de Chlamydophila spp em amostras biológicas de animais experimentalmente e naturalmente infectados |
Autor: |
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Francielle Gibson da Silva Zacarias
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Categoria: |
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Teses e Dissertações |
Idioma: |
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Português |
Instituição:/Parceiro |
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[cp] Programas de Pós-graduação da CAPES
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Instituição:/Programa |
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UEL/CIÊNCIA ANIMAL |
Área Conhecimento |
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MEDICINA VETERINÁRIA |
Nível |
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Doutorado
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Ano da Tese |
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2007 |
Acessos: |
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954 |
Resumo |
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Chlamydophila abortus (anteriormente classificada como Chlamydia psittaci sorotipo 1) tem sido descrita em muitos países; associada principalmente com distúrbios reprodutivos em ovinos; bovinos e caprinos. A detecção de C. abortus é usualmente realizada por métodos sorológicos (fixação de complemento; ELISA) e de cultivo em células de linhagens ou ovo embrionado de galinha. O diagnóstico pela amplificação do DNA pela PCR tem sido proposto por apresentar alta sensibilidade e especificidade. Este trabalho teve por objetivo detectar Chlamydophila spp por técnicas molecular e sorológica em amostras biológicas de animais experimentalmente e naturalmente infectados. Um sistema de PCR foi desenvolvida para a amplificação do espaço intergênico 16S-23S do RNAr da família Chlamydiaceae; em órgãos de camundongos (n=15) experimentalmente infectados com a estirpe de referência S26/3 da C. abortus. Os resultados encontrados foram comparados a outro sistema de PCR previamente descrito para o gene Omp2 (outer major protein). Dos 15 camundongos inoculados com C. abortus; 13 foram positivos na RNAr PCR e nove na Omp2 PCR. O limite de detecção de C. abortus pela RNAr PCR (1;05 unidades formadoras de inclusão -UFI) foi cem vezes superior à Omp2 PCR (105 UFI). A RNAr PCR também foi utilizada para a detecção da C. abortus em uma coleção de abortos bovinos (n=85); ovinos (n=12) e caprinos (n=8); em amostras de muco vaginal de ovelhas (n=90) e de cabras (n=20) e em sêmen de ovinos (n=10) e caprinos (n=5); coletados no período de 2002 a 2007. Um controle interno (PCR com os primers BOV1 e BOV2 para o gene ND5 do DNA mitocondrial de bovino) foi utilizado nas amostras de aborto bovino para a avaliação da eficiência das técnicas de extração e de amplificação do DNA. Todas as amostras de aborto; muco vaginal e sêmen foram negativas para C. abortus na RNAr PCR. O controle interno amplificou um produto de 626 pb para o gene ND5 em todas as amostras de aborto bovino. Para o diagnóstico sorológico; 3.102 amostras de soro de fêmeas bovinas (idade ≥ 24 meses) provenientes de 373 propriedades; com histórico de abortamento; foram testadas pela prova de fixação de complemento. As propriedades rurais com abortamento foram selecionadas dentro do delineamento amostral do Plano Nacional para o Controle e Erradicação da Brucelose no estado do Paraná. Ao total; 44 (1;42%) animais foram positivos com títulos ≥32. A soroprevalência estimada para Chlamydophila spp nas propriedades foi de 8;82% (6;15%-12;17%). A criação de animais confinados ou semiconfinados foi considerada uma associação de risco (OR= 2;21; p= 0;031). Apesar da falta de evidência de C. abortus nas amostras de aborto; muco vaginal e sêmen; avaliadas pela PCR neste trabalho; os resultados sorológicos positivos das fêmeas bovinas de propriedades com histórico de abortamento no estado do Paraná sugerem a presença da bactéria. Assim; novos estudos sobre a ocorrência de Chlamydophila spp. em rebanhos bovinos; ovinos e caprinos do país devem ser realizados. |
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