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Título:  
  Diagnóstico molecular e sorológico de Chlamydophila spp em amostras biológicas de animais experimentalmente e naturalmente infectados
Autor:  
  Francielle Gibson da Silva Zacarias   Listar as obras deste autor
Categoria:  
  Teses e Dissertações
Idioma:  
  Português
Instituição:/Parceiro  
  [cp] Programas de Pós-graduação da CAPES   Ir para a página desta Instituição
Instituição:/Programa  
  UEL/CIÊNCIA ANIMAL
Área Conhecimento  
  MEDICINA VETERINÁRIA
Nível  
  Doutorado
Ano da Tese  
  2007
Acessos:  
  911
Resumo  
  Chlamydophila abortus (anteriormente classificada como Chlamydia psittaci sorotipo 1) tem sido descrita em muitos países; associada principalmente com distúrbios reprodutivos em ovinos; bovinos e caprinos. A detecção de C. abortus é usualmente realizada por métodos sorológicos (fixação de complemento; ELISA) e de cultivo em células de linhagens ou ovo embrionado de galinha. O diagnóstico pela amplificação do DNA pela PCR tem sido proposto por apresentar alta sensibilidade e especificidade. Este trabalho teve por objetivo detectar Chlamydophila spp por técnicas molecular e sorológica em amostras biológicas de animais experimentalmente e naturalmente infectados. Um sistema de PCR foi desenvolvida para a amplificação do espaço intergênico 16S-23S do RNAr da família Chlamydiaceae; em órgãos de camundongos (n=15) experimentalmente infectados com a estirpe de referência S26/3 da C. abortus. Os resultados encontrados foram comparados a outro sistema de PCR previamente descrito para o gene Omp2 (outer major protein). Dos 15 camundongos inoculados com C. abortus; 13 foram positivos na RNAr PCR e nove na Omp2 PCR. O limite de detecção de C. abortus pela RNAr PCR (1;05 unidades formadoras de inclusão -UFI) foi cem vezes superior à Omp2 PCR (105 UFI). A RNAr PCR também foi utilizada para a detecção da C. abortus em uma coleção de abortos bovinos (n=85); ovinos (n=12) e caprinos (n=8); em amostras de muco vaginal de ovelhas (n=90) e de cabras (n=20) e em sêmen de ovinos (n=10) e caprinos (n=5); coletados no período de 2002 a 2007. Um controle interno (PCR com os primers BOV1 e BOV2 para o gene ND5 do DNA mitocondrial de bovino) foi utilizado nas amostras de aborto bovino para a avaliação da eficiência das técnicas de extração e de amplificação do DNA. Todas as amostras de aborto; muco vaginal e sêmen foram negativas para C. abortus na RNAr PCR. O controle interno amplificou um produto de 626 pb para o gene ND5 em todas as amostras de aborto bovino. Para o diagnóstico sorológico; 3.102 amostras de soro de fêmeas bovinas (idade ≥ 24 meses) provenientes de 373 propriedades; com histórico de abortamento; foram testadas pela prova de fixação de complemento. As propriedades rurais com abortamento foram selecionadas dentro do delineamento amostral do Plano Nacional para o Controle e Erradicação da Brucelose no estado do Paraná. Ao total; 44 (1;42%) animais foram positivos com títulos ≥32. A soroprevalência estimada para Chlamydophila spp nas propriedades foi de 8;82% (6;15%-12;17%). A criação de animais confinados ou semiconfinados foi considerada uma associação de risco (OR= 2;21; p= 0;031). Apesar da falta de evidência de C. abortus nas amostras de aborto; muco vaginal e sêmen; avaliadas pela PCR neste trabalho; os resultados sorológicos positivos das fêmeas bovinas de propriedades com histórico de abortamento no estado do Paraná sugerem a presença da bactéria. Assim; novos estudos sobre a ocorrência de Chlamydophila spp. em rebanhos bovinos; ovinos e caprinos do país devem ser realizados.
     
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