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Tipo de Mídia:
Texto
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Formato:
.pdf
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Tamanho:
1.43
MB
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Título: |
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Estudo do mecanismo de transferência horizontal da sequência de inserção IS1245, específica de Mycobacterium avium, para Mycobacterium kansasii |
Autor: |
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Michelle Christiane da Silva Rabello
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Categoria: |
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Teses e Dissertações |
Idioma: |
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Português |
Instituição:/Parceiro |
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[cp] Programas de Pós-graduação da CAPES
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Instituição:/Programa |
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UNIFESP/MICROBIOLOGIA E IMUNOLOGIA |
Área Conhecimento |
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MICROBIOLOGIA |
Nível |
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Doutorado
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Ano da Tese |
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2009 |
Acessos: |
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731 |
Resumo |
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Mycobacterium avium e Mycobacterium kansasii são micobactérias não
tuberculosas frequentemente isoladas em infecções em pacientes HIV positivos. Em um
projeto anterior do laboratório foi estudado um cultivo misto de M. avium e M. kansasii
isolado da medula óssea de um paciente HIV positivo. Estudando colônias isoladas
deste cultivo, foi possível observar que a cepa de M. kansasii possuía a sequência de
inserção IS1245, que é especifica de M. avium. A presença deste elemento de inserção
em M. kansasii foi confirmada por PCR-IS1245, RFLP-IS1245 e sequenciamento. Este
estudo teve como objetivo investigar o mecanismo de transferência da IS1245 para M.
kansasii. Uma banda de aproximadamente 100 kb foi detectada por PFGE em colônias
de M. avium e de M. kansasii deste cultivo misto. Testes de mobilidade desta banda de
DNA em géis de PFGE, em diferentes condições de corrida, e testes com exonucleases e
com topoisomerase I comprovaram que esta banda era um plasmídeo linear (pMA100),
que continha proteínas covalentemente ligada nos seus terminais 5. Estes achados
levaram à hipótese de que o plasmídeo pMA100 seria responsável pela transferência
natural do elemento IS1245 de M. avium para M. kansasii por conjugação.
Experimentos in vitro reproduziram o evento de conjugação, tanto com a cepa de M.
kansasii isolada do cultivo misto, como com outras duas cepas de M. kansasii não
relacionadas. A sequência de inserção se manteve estável no genoma de M. kansasii
após 10 subcultivos e foi observada a ocorrência de transposição de modo replicativo
em M. kansasii. Pela primeira vez está sendo demonstrada a transferência horizontal de
genes natural entre espécies diferentes de micobactérias. |
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